FussionTM超保真聚合酶

For PCR Enzyme: 5u/μl Cat.: E2055

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FussionTMHi-Fi DNA Polymerase(FussionTM超保真聚合酶)是由南京德泰生物公司生产的高质量高标准的DNA聚合酶,具有高保真度,高产量和快速合成等优异性能,适用于各种PCR反应。在难扩增序列、粗提取样品等方面有很好的扩增效果,受到了广泛的好评。

活性

用仓鼠卵巢细胞DNA作为模板/引物,在72℃,30分钟,摄入10 nmol dNTP的活性定义为1个活性单位(U)。

产品优势

  1. 高扩增成功率
  2. 高扩增效率
  3. 出色的延伸性
  4. 高保真度
  5. 平端克隆,3‘→ 5’外切酶活性

应用

常规PCR
富含AT/GC复杂模板扩增
cDNA克隆
文库构建
定点突变

包装及报价

250U 300元
500U 510元
1000U 900元

制品内容

FussionTM Hi-Fi
10×buffer(Mg2+)
5×buffer(Mg2+)
dNTP mixture 10mM each
ddH2O PCR grade

模板加入量说明

人类基因组DNA 10-200ng
大肠杆菌基因组DNA 100pg-100ng
λDNA 100pg-100ng
质粒DNA 100pg-10ng

PCR反应体系

试剂 体积 最终浓度
10×Buffer(Mg2+) 5μl
dNTP 10mM each 1μl 200uM each
primer 1 1μl 0.2~0.5uM
primer 2 1μl 0.2~0.5uM
Template 0.1ng-0.5ug
FusionTM 1μl 0.1U/ul
ddH2O PCR grade Up to 50μl

注:冰上配置PCR反应体系, DNA聚合酶最后加入到PCR体系中

PCR反应条件

2 step protocol 3 step protocol
步骤 温度 时间 温度 时间 循环数
预变性 98℃ 30s 98℃ 30s 1
变性 98℃ 10s 98℃ 30s 25~30
退火 50-72℃ 10-30s
延伸 68℃ 15-30s/kb 72℃ 15-30s/kb
终延伸 72℃ 5-10min 72℃ 5-10min 1

注:一般推荐25-35个循环。对于长片段扩增,可以适当降低循环数至20

案例介绍

高保真聚合酶以人类基因组DNA为模板扩增

以人类基因组DNA为模板扩增0.5k 0.8k 1k 1.6k 2.2k 4.2k的PCR片段

超保真聚合酶以小鼠动力蛋白全长cDNA为模板扩增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

以小鼠动力蛋白全长cDNA为模板扩增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

高保真酶以人类基因组为模板扩增Vinculin 基因片段

1,2:FussionTM Hi-Fi DNA Polymerase
3,4:KOD DNA Polymerase
5,6:PFU-ultra DNA polymerase
以人类基因组为模板扩增Vinculin 基因片段
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