FussionTM超保真聚合酶
For PCR | Enzyme: 5u/μl | Cat.: E2055 |
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FussionTMHi-Fi DNA Polymerase(FussionTM超保真聚合酶)是由南京德泰生物公司生产的高质量高标准的DNA聚合酶,具有高保真度,高产量和快速合成等优异性能,适用于各种PCR反应。在难扩增序列、粗提取样品等方面有很好的扩增效果,受到了广泛的好评。
活性
用仓鼠卵巢细胞DNA作为模板/引物,在72℃,30分钟,摄入10 nmol dNTP的活性定义为1个活性单位(U)。
产品优势
- 高扩增成功率
- 高扩增效率
- 出色的延伸性
- 高保真度
- 平端克隆,3‘→ 5’外切酶活性
应用
常规PCR |
富含AT/GC复杂模板扩增 |
cDNA克隆 |
文库构建 |
定点突变 |
包装及报价
250U | 300元 |
500U | 510元 |
1000U | 900元 |
制品内容
FussionTM Hi-Fi |
10×buffer(Mg2+) |
5×buffer(Mg2+) |
dNTP mixture 10mM each |
ddH2O PCR grade |
模板加入量说明
人类基因组DNA | 10-200ng |
大肠杆菌基因组DNA | 100pg-100ng |
λDNA | 100pg-100ng |
质粒DNA | 100pg-10ng |
PCR反应体系
试剂 | 体积 | 最终浓度 |
10×Buffer(Mg2+) | 5μl | 1× |
dNTP 10mM each | 1μl | 200uM each |
primer 1 | 1μl | 0.2~0.5uM |
primer 2 | 1μl | 0.2~0.5uM |
Template | | 0.1ng-0.5ug |
FusionTM | 1μl | 0.1U/ul |
ddH2O PCR grade | Up to 50μl | |
注:冰上配置PCR反应体系, DNA聚合酶最后加入到PCR体系中
PCR反应条件
| 2 step protocol | 3 step protocol | |
步骤 | 温度 | 时间 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 30s | 98℃ | 30s | 1 |
变性 | 98℃ | 10s | 98℃ | 30s | 25~30 |
退火 | – | – | 50-72℃ | 10-30s |
延伸 | 68℃ | 15-30s/kb | 72℃ | 15-30s/kb |
终延伸 | 72℃ | 5-10min | 72℃ | 5-10min | 1 |
注:一般推荐25-35个循环。对于长片段扩增,可以适当降低循环数至20
案例介绍

以人类基因组DNA为模板扩增0.5k 0.8k 1k 1.6k 2.2k 4.2k的PCR片段

以小鼠动力蛋白全长cDNA为模板扩增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

1,2:FussionTM Hi-Fi DNA Polymerase
3,4:KOD DNA Polymerase
5,6:PFU-ultra DNA polymerase
以人类基因组为模板扩增Vinculin 基因片段