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单抗制备 杂交瘤测序 蛋白表达

FussionTM超保真聚合酶

For PCREnzyme: 5u/μlCat.: E2055

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FussionTMHi-Fi DNA Polymerase(FussionTM超保真聚合酶)是由南京德泰生物公司生产的高质量高标准的DNA聚合酶,具有高保真度,高产量和快速合成等优异性能,适用于各种PCR反应。在难扩增序列、粗提取样品等方面有很好的扩增效果,受到了广泛的好评。

活性

用仓鼠卵巢细胞DNA作为模板/引物,在72℃,30分钟,摄入10 nmol dNTP的活性定义为1个活性单位(U)。

产品优势

  1. 高扩增成功率
  2. 高扩增效率
  3. 出色的延伸性
  4. 高保真度
  5. 平端克隆,3‘→ 5’外切酶活性

应用

常规PCR
富含AT/GC复杂模板扩增
cDNA克隆
文库构建
定点突变

包装及报价

250U300元
500U510元
1000U900元

制品内容

FussionTM Hi-Fi
10×buffer(Mg2+)
5×buffer(Mg2+)
dNTP mixture 10mM each
ddH2O PCR grade

模板加入量说明

人类基因组DNA10-200ng
大肠杆菌基因组DNA100pg-100ng
λDNA100pg-100ng
质粒DNA100pg-10ng

PCR反应体系

试剂体积最终浓度
10×Buffer(Mg2+)5μl
dNTP 10mM each1μl200uM each
primer 11μl0.2~0.5uM
primer 21μl0.2~0.5uM
Template0.1ng-0.5ug
FusionTM1μl0.1U/ul
ddH2O PCR gradeUp to 50μl

注:冰上配置PCR反应体系, DNA聚合酶最后加入到PCR体系中

PCR反应条件

2 step protocol3 step protocol
步骤温度时间温度时间循环数
预变性98℃30s98℃30s1
变性98℃10s98℃30s25~30
退火50-72℃10-30s
延伸68℃15-30s/kb72℃15-30s/kb
终延伸72℃5-10min72℃5-10min1

注:一般推荐25-35个循环。对于长片段扩增,可以适当降低循环数至20

案例介绍

高保真聚合酶以人类基因组DNA为模板扩增

以人类基因组DNA为模板扩增0.5k 0.8k 1k 1.6k 2.2k 4.2k的PCR片段

超保真聚合酶以小鼠动力蛋白全长cDNA为模板扩增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

以小鼠动力蛋白全长cDNA为模板扩增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

高保真酶以人类基因组为模板扩增Vinculin 基因片段

1,2:FussionTM Hi-Fi DNA Polymerase
3,4:KOD DNA Polymerase
5,6:PFU-ultra DNA polymerase
以人类基因组为模板扩增Vinculin 基因片段