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鼠单抗制备 兔单抗制备 杂交瘤测序 蛋白表达

原核(E. coli)表达系统

大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛,也是最经济实惠的蛋白表达系统。E.coli遗传背景清楚、表达系统完善、操作方便、增殖快、成本低、表达量高、稳定性好,适用于多种属蛋白的表达,尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势,但原核表达易形成不可溶的包涵体。德泰生物拥有超十年的蛋白表达经验,丰富的包涵体复性经验,可提供从密码子优化到重组蛋白表达纯化的一站式服务。

服务优势

经验丰富

原核表达蛋白3000+
丰富的包涵体复性经验

高成功率

成功率>95%
多种套餐不成功不收费

自主研发

上清表达优化
提高蛋白可溶性表达

一站式服务

从密码子优化到
原核蛋白表达纯化

服务内容

序列分析&密码子优化

1天

客户提供目的蛋白序列,德泰对稀有密码子、密码子偏好性等因素进行分析优化

基因合成&载体构建

1周

对合成的基因进行测序验证,克隆至德泰专有的高效表达载体中

表达小试&可溶性分析

1周

选择不同菌株进行多种表达条件优化,提高蛋白可溶性表达

放大表达&纯化

1-2周

选择合适的纯化方法,结合先进的AKTA纯化设备来纯化蛋白

交付:3-5mg蛋白;蛋白质检报告;表达载体1μg;基因测序报告;项目流程报告

案例展示

案例1:在大肠杆菌中无标签蛋白的表达纯化

①全菌破菌离心后上清电泳检测结果

Lane M:Protein marker
Lane 1~2:全菌破菌离心后上清

②初步纯化后蛋白电泳检测结果

Lane M:Protein marker
Lane 1:过疏水柱后的蛋白

③二次纯化后蛋白电泳检测结果

Lane M:Protein marker
Lane 1~10:Sephracyl纯化的蛋白

案例2:包涵体复性纯化

①复性后初次亲和层析纯化结果

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 包涵体溶解后上清
Lane 2:上清同Ni-IDA孵育后流出液
Lane 3-6: 50 mM Imidazole的洗脱组分
Lane 7-12: 500 mM Imidazole的洗脱组分

②二次离子交换层析纯化结果

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: Ni-IDA纯化后的洗脱液
Lane 2: 同SP Beads 6FF柱孵育后流出液
Lane 3-4: 50 mM NaCl的洗脱组分
Lane 5-8: 500 mM NaCl的洗脱组分

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