猴痘病毒重组抗原抗体开发

猴痘是一种由猴痘病毒(mpox virus,MPXV)感染所引起的人畜共患病毒性疾病,与天花病毒、鼠痘病毒、痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)等同属于正痘病毒属猴痘病毒。

MPXV是线性双链DNA病毒,长度约197kb,其特征为砖形或椭圆形,直径为200~250nm;MPXV基因组结构与其他正痘病毒非常相似,具有90%以上的序列同源性,基因结构特征是高度保守的中心区域,左右两端可变区域和连续重复的反向末端区域。

MPXV

世卫组织专家根据MPXV株的基因、临床特征和流行病学差异,将其分支命名为分支Ⅰ(中非)、分支Ⅱ(西非)。分支Ⅰ病毒株与重症疾病相关,病死率高达10%,分支Ⅱa病毒株致病性较低,病死率约为1%。根据世卫组织官方统计,2024年7月以来多个国家陆续出现Ⅰb进化枝病例,短时间内病例数逐渐增加,引起全球的高度关注。

德泰生物推出猴痘病毒(MPXV)重组抗原抗体开发服务,可针对客户需求猴痘病毒核心蛋白,制备重组抗原与相应抗原检测的抗体试剂。从抗原制备、抗体制备到应用平台验证、试剂大规模生产一站式服务,加速猴痘病毒免疫诊断检测、治疗性抗体及疫苗研发的进程。

服务流程

猴痘病毒重组蛋白开发

Monkeypox-virus-workflow

猴痘病毒抗体开发

Monkeypox-virus-workflow

服务内容

猴痘病毒重组蛋白开发

阶段 服务内容 周期 交付
基因合成
  • 序列分析
  • 密码子优化
4~5周
  • 表达质粒
  • 测序报告
  • 纯化蛋白
  • 质量检验报告(CoA)
  • 基因合成
  • 载体构建
瞬时转染
  • 质粒抽提
  • 转染表达
  • 细胞培养
表达纯化
  • 表达鉴定
  • 蛋白纯化

猴痘病毒抗体开发

阶段 服务内容 周期 交付
动物免疫
  • 抗原制备(可选)
  • 动物免疫
  • 效价检测
鼠单抗:快至29天
兔单抗:快至59天
  • 5-10株ELISA阳性克隆
  • 抗体序列及表达质粒
  • 纯化1mg抗体
  • ≥1对配对抗体(可选)
  • 质量检验报告(CoA)
“1+1”双筛选
  • 记忆B细胞筛选
  • 浆细胞筛选
BGE®高通量表达及功能验证
  • ELISA Assay
  • 亲和力测定(可选)
  • 临床反应性验证(可选)
单克隆抗体基因测序
  • 高通量基因测序
抗体配对(可选)
  • 抗体配对筛选
2周
应用平台验证(可选)
  • 胶体金验证
  • 化学发光验证
详询
重组抗体表达与纯化(可选)
  • 转染级质粒制备
  • 瞬时转染表达
  • 高通量纯化
详询

猴痘病毒核心蛋白

猴痘病毒的核心蛋白A29L、A35R、M1R、B6R、H3L和E8L在病毒的生命周期中扮演着重要的角色。这些核心蛋白及相关中和抗体的研究对于诊断试剂、疫苗等不同方向的研究具有重要意义。

Monkeypox-virus-protein

猴痘病毒(MPXV)A29L蛋白

A29L是细胞内成熟病毒(IMV)表面包膜蛋白,与VACV A27同源,在痘病毒科中广泛保守。包膜蛋白A27在病毒生命周期中发挥多种作用,包括与细胞表面硫酸乙酰肝素结合,调节膜融合以及介导成熟病毒(IMV)转运形成包膜病毒(IEV)。

猴痘病毒(MPXV)A35R蛋白

A35R是细胞内包膜病毒粒子(IEV)和细胞外包膜病毒粒子(EEV)的包膜成分,与脊索痘病毒A33R同源。A35R在病毒传播中发挥着关键作用,是疫苗开发的重要靶标,并具有血清学检测的潜力。A33R蛋白在Ab抗性传播中起作用,同时A35R蛋白的胞质结构域与A36R的相互作用对于病毒粒子的运动和肌动蛋白尾成核至关重要。

猴痘病毒(MPXV)M1R蛋白

M1R与VACV L1蛋白同源,是一种在成熟IMV颗粒表面发现的跨膜蛋白。由L1RORF编码,高度保守,参与病毒粒子组装,在病毒进入和成熟过程中发挥重要作用。L1是诱导低pH触发的细胞融合所必需的,且对VACV复制至关重要。

猴痘病毒(MPXV)B6R蛋白

B6R是宿主范围蛋白,位于细胞外包膜病毒粒子(EEV)的膜上,与VACV补体控制蛋白B5同源,参与补体激活的负调节。B5结合补体成分C3和C1q,阻断多个位点的补体激活,下调促炎趋化因子(C3a、C4a和C5a),从而减少细胞内流和炎症。B5在不同的正痘病毒和B5抗体中保守,可保护宿主免受VACV攻击。

猴痘病毒(MPXV)H3L蛋白

H3L蛋白是一种324个AA长的糖基转移酶,可以通过其C端疏水结构附着在病毒包膜上,并与细胞表面的硫酸乙酰肝素结合,促进病毒进入。H3L蛋白是细胞免疫应答的靶标,对于触发宿主细胞产生T细胞和B细胞免疫反应至关重要。此外,该蛋白产物也是中和抗体的主要靶点。

猴痘病毒(MPXV)E8L蛋白

E8L蛋白是VACV D8L的同源蛋白,对于病毒粒子附着到宿主细胞中至关重要。痘病毒通常依靠富含带负电荷的神经节苷脂的宿主细胞表面脂筏进入宿主细胞。E8L具有一个神经节苷脂结合结构域,该结构域与三个潜在的线性B细胞表位重叠。使用来自E8L蛋白的表位理论上可以产生有效的中和抗体。在考虑疫苗靶标时,E8L蛋白的这些特性可能使其成为一种有吸引力的免疫原。

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