那些年,我们用过的磁珠

分子诊断是以核酸作为检测对象,主要应用于临床各科的诊断中,如肿瘤、感染、遗传等各方面,而核酸提取是分子诊断实验的“第一步”。通过对磁珠进行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),从而可以实现对核酸的高通量、自动化提取,这一技术产生于20世纪80年代,已经有了成熟的试剂盒并形成为产业。

磁珠法提取核酸的原理及步骤

磁珠纯化

核酸结合到磁珠上主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用。细胞或组织在裂解液作用下,其中的DNA/RNA被释放出来。此时经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠即与核酸进行“特异性结合”,形成“核酸-磁珠复合物”。然后在外加磁场的作用下,复合物即分离出来。最后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂志、去盐、纯化后,即得到欲提取的核酸物质。

传统核酸提取法与磁珠法比较

磁珠纯化比较

随着基因检测、个性化给药、产前诊断等的普及,在生物行业各领域都追求高通量、自动化的今天,传统DNA提取方法的局限愈来愈明显,而磁珠法DNA提取的优势则愈来愈明显:能够实现自动化、大批量操作;操作简单、用时短;不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,安全无毒完全符合现代环保理念;与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。
磁珠法提取DNA试剂盒要比传统的方法(Chelex100 法、有机法、二氧化硅法、盐析法等)更为简单、方便,转移离心管的次数较少,不易污染等。
磁珠法提取DNA试剂盒是纳米技术、分子生物学技术、生物医学技术和法医学技术的综合高科技产品。
可广泛应用于分子生物学中的基因组研究、分子进化研究、医学中遗传病的研究、突变基因的检测、肿瘤的筛查、HPV等的检测、HLA分型、移植配型等、法医学生物样本血斑、精斑、头发、烟蒂等现场证物的检测、和司法上的亲子鉴定、血缘关系的鉴定等提供证据、考古学、大中小学的生物试验等许多领域。

免疫磁珠引领分离技术的一次革命

免疫磁珠
免疫磁珠,(ImpetiCbead,IMB简称磁珠),是发展起来的一项新的免疫学技术,它将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体,以免疫学为基础,渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域,其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。

免疫磁珠原理

免疫磁珠原理
利用人工合成的内含铁成分,可被磁铁磁力所吸引,外有功能基团,可结合活性蛋白质(抗体)的磁珠,作为抗体的载体。当吸附在磁珠上的抗体与相应的微生物或特异性抗原物质结合后,则形成“抗原-抗体-磁珠免疫复合物”,这种复合物具有较高的磁响应性,在磁铁磁力的作用下定向移动,使复合物与其他物质分离,而达到分离、浓缩、纯化微生物或特异性抗原物质的目的。

免疫磁珠的应用范围

免疫磁珠应用范围
免疫磁珠是由John Ugelstar等在1979年首先制备出,是磁珠免疫微球的一种,为包被有单克隆抗体的球型磁性微粒,可特异性地与靶物质结合使之具有磁响应性,从此被广泛地应用于医学卫生领域的许多方面,并由此引发了生物分离技术上的一次革命。其主要被应用在细胞分选(MACS)、免疫检测和疾病诊断(细胞因子检测、无创产前诊断)、癌症治疗、食品及环境中微生物检测等方面。

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