近日，第三军医大学新桥医院肾内科研究人员发表论文，旨在构建含有与溶酶体膜蛋白2（LAMP-2）P41-49完全同源序列的尿路致病性大肠杆菌（UPEC）Ⅰ型菌毛FimH1-156为目的基因的原核载体，表达并纯化FimH1-156融合蛋白。研究指出，成功克隆FimH1-156融合蛋白表达基因并构建至原核表达载体，获得了包涵体纯化的FimH1-156融合蛋白，为下一步建立实验动物模型奠定了基础。该文发表在2014年第05期《重庆医学》杂志上。
采用PCR克隆pPKL241质粒获取FimH1-156基因，插入原核表达载体pET28a（+）；将重组表达质粒转染感受态E.coli BL21（DE3），经IPTG诱导表达FimH1-156融合蛋白，超声裂解细菌，NiNTA层析法进行纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析、蛋白免疫印迹法（Western blot）对其进行鉴定。
成功构建表达载体，经对融合蛋白表达条件的优化，在IPTG浓度为1mmol/L，诱导4h目的蛋白表达量最高，主要以包涵体形式存在；Western blot证实该FimH1-156融合蛋白可与抗6×His单克隆抗体发生结合反应。
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