哺乳动物细胞瞬时表达

哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能,其表达的重组蛋白在分子结构、理化性质和生物学功能方面相比较于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统最接近天然的高等生物蛋白质分子。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中备受青睐。德泰生物主要以CHO(中国仓鼠卵巢细胞)和HEK293(人胚肾细胞)为表达宿主进行悬浮培养,可生产出毫克至克级的重组蛋白。

服务优势

经验丰富

经验丰富

超10年蛋白表达经验
哺乳表达蛋白3000+
包含各种类型的蛋白

高成功率

高成功率

cGMP标准的细胞房
多项专有实验技术
实验成功率大于98%

自主研发

自主研发

高表达培养基策略
高表达载体
高密度细胞培养技术

一站式服务

一站式服务

从密码子优化
到蛋白表达纯化
的一站式服务

服务流程

序列分析&密码子优化

1天

客户提供目的蛋白序列,德泰对稀有密码子、密码子偏好性等因素进行分析优化

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基因合成&载体构建

1周

对合成的基因进行测序验证,克隆至德泰专有的高效表达载体中

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质粒抽提&转染表达

1周

确定质粒的检测结果达到转染要求,选择合适的转染方法和宿主细胞

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蛋白表达&纯化

3天

选择合适的纯化方法,结合先进的AKTA纯化设备来纯化蛋白

交付:0.5mg蛋白;蛋白质检报告;克隆质粒1μg; 基因测序报告;项目流程报告

案例展示

案例1:四聚体蛋白表达纯化

四聚体蛋白表达纯化

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 细胞培养上清
Lane 2: 流出液
Lane 3: 洗脱组分(还原)
Lane 4: 洗脱组分(非还原)

案例2:糖基化修饰蛋白表达纯化

糖基化修饰蛋白表达纯化

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 细胞培养上清
Lane 2: 流出液
Lane 3-5: 洗脱组分

案例3:大分子量蛋白表达纯化

大分子量蛋白表达纯化

Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 细胞培养上清
Lane 2: 流出液
Lane 3-5: 洗脱组分

Tips:如何选择哺乳动物表达系统宿主细胞,CHO 还是 HEK293?

CHO细胞 HEK293细胞
中国仓鼠卵巢细胞
(Chinese Hamster Ovary Cell)
人胚胎肾细胞
(Human Embryonic Kidney 293 Cell)
鼠源蛋白或抗体、治疗性蛋白或抗体优先选择 人源、猪源兔源等物种来源的蛋白或抗体优先选择
难转染,转染效率低 易转染,转染效率高
瞬时表达和稳定表达 瞬时表达
细胞生长速度慢 细胞生长速度快
很少分泌外源蛋白,利于分离纯化 细胞生长密度高,蛋白表达量高

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