Murine RNase Inhibitor是在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,它以1∶1的非共价结合方式特异性抑制RNase(A、B和C),从而保护RNA完整度不被降解。本产品可与各种商业化Reverse Transcriptase和DNA Polymerase兼容,可用于后续RT-PCR试验等。Murine RNase Inhibitor不含人源蛋白中两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,相比人源RNase inhibitor具有更高的抗氧化活性,更加适合于高浓度DTT试验(如qPCR)。
1.RT-PCR。
2.在体外转录/翻译(如病毒体外复制体系)中对RNA进行保护。
3. RNA完整性保护试验。
抑制5ng RNase A 50%活性所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
-20°C保存,冷冻运输。
1. 在RNase-free离心管中配制上述反应体系混合液:
RNase-free ddH2O | to 20 μL |
5 × HiScript Buffer | 4 μL |
Oligo (dT)18 (50 µM) | 1 μL |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 μL |
Murine RNase Inhibitor (40 U/µl) | 1 μL |
HiScript Reverse Transcriptase (200 U/µl) | 1 μL |
模板RNA | 10 pg – 2.5 μg |
2. 轻轻混匀;
3. 50℃ 45 min,70℃ 15 min;
4. 产物于-20℃保存。
1. 本产品的活性温度在42℃表现最大活性,50℃以上失活。
2. 本产品抑制 RNase 活性的 pH 值范围较广,在pH 7.0 – 8.0时表现最大活性。
3. 本产品在使用前避免剧烈震荡,轻弹混匀较好。
4. 本产品不抑制RNase H及RNase T1活性。
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