LonEZTM长片段高保真聚合酶(已售罄)
For PCR |
Enzyme: 5u/μl |
Cat.: E3055 |
相关产品:Relia™热启动Taq酶 Fussion™ 高保真聚合酶
LonEZTM长片段高保真聚合酶是南京德泰生物新推出的专为长片段PCR设计的高保真聚合酶。该酶是将单链DNA结合蛋白和聚合酶活性片段巧妙地融合在一起,通过重组表达获得。可轻松实现对35kb目标片段的精准扩增。LonEZ 不仅有很好的长片段扩增能力,还有大于Pfu的高保真性,是基因组长片段PCR及相关实验的推荐用酶。
活性
以仓鼠卵巢细胞DNA作为模板/引物,在72℃,在30分钟摄入10nmol dNTP的活性定义为1个活性单位(U)。
产品优势
- 长片段扩增:以λDNA为模板,轻松实现35kb基因扩增
- 高保真:通过扩增LacZ基因,蓝白斑验证,保真度为Pfu 1.6倍
- 速度快:5kb目的片段扩增,延伸只需25秒
制品内容
LonEZTM高保真聚合酶 |
10×buffer(Mg2+) |
5×buffer(Mg2+) |
5×df buffer |
dNTP mixture 10mM each |
ddH2O PCR grade |
模板加入量说明
人类基因组DNA |
0.1~1µg |
大肠杆菌基因组DNA |
10ng~100ng |
λDNA |
0.5~10ng |
质粒DNA |
0.1-10ng |
PCR反应体系
试剂 |
体积 |
最终浓度 |
10×Buffer(Mg2+) |
5μl |
1× |
dNTP 10mM each |
4μl |
0.8mM each |
primer 1 |
1μl |
0.5uM |
primer 2 |
1μl |
0.5uM |
Template |
|
0.1ng-0.5ug |
LonEZTM(5U/ul) |
1μl |
0.1U/ul |
ddH2O PCR grade |
Up to 50μl |
|
注:冰上配置PCR反应体系, DNA聚合酶最后加入到PCR体系中
PCR反应条件
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
预变性 |
95℃ |
3min |
1 |
变性 |
95℃ |
30s |
25~30 |
退火 |
60℃ |
30s |
延伸 |
72℃ |
10min |
终延伸 |
72℃ |
15min |
1 |
案例介绍

以λDNA为模板,PCR扩增1.2kb-30kb目标片段,有很好的扩增效果

M: λHand III marker 1: 5U的普通Taq酶
2,3,4: 1U,2U,5U的LonEZ 5: 5U的KOD
6,7,8: 1U,2U,3U的LonEZ

模板:人类基因组
目的片段:15kb
1:普通Taq酶
2:LA-PCR Kit(Brand T)
3:LonEZ
DNA Marker:10k to 5k

模板:λDNA
目的片段:35kb
1,2:LonEZ
DNA Marker:10k to 0.5k