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鼠单抗制备 兔单抗制备 杂交瘤测序 蛋白表达

杂交瘤抗体基因测序

杂交瘤细胞在保存过程中易存在污染、基因丢失、细胞状态不好甚至死亡等问题,这些都会影响产生的抗体质量。通过将杂交瘤细胞中的抗体基因提取并测序,得到相应的核苷酸序列,以便于后期外源抗体的稳定表达生产。

德泰生物拥有mRNA全长测序平台和Failsafe®假基因排除技术,能够提供快速、可靠的杂交瘤抗体基因测序服务。该服务基于RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术,可对抗体的可变区或全长进行准确测序。测序范围涵盖小鼠、大鼠、兔、山羊等物种。同时,德泰生物还拥有成熟的抗体表达平台,可以将获得的抗体基因进行表达、纯化、验证。

服务优势

极速体验:8小时可出PCR结果,得出抗体亚型
细胞需求少:只需1~5个细胞,可以接收孔板样品
自主研发:高效的酶和引物,5天交付的同时保证100%成功率
技术先进:可测小鼠、大鼠、兔、山羊等物种的IgM和IgG的所有亚型,测序无通量限制
准确性高:采用Failsafe®假基因排除技术,可排除κ轻链假基因
一站式服务:德泰生物拥有丰富经验,可提供表达验证服务

服务流程

服务内容

阶段服务内容周期交付
阶段Ⅰ 第一链cDNA扩增
  • 细胞裂解
  • 扩增第一链cDNA
5天
  • 详细的实验报告
  • 轻重链测序报告
  • 包含抗体片段的质粒(可选)
  • 至少交付0.5mg抗体
    SDS纯度≥90%(可选)
阶段Ⅱ 抗体基因扩增
  • 基因预扩增
  • 分段基因特异性扩增
阶段Ⅲ 测序
  • 克隆至载体
  • Sanger测序
  • 生物信息学分析
阶段Ⅳ 瞬时转染表达与纯化(可选)
  • 转染级质粒制备
  • 瞬时转染表达
  • 细胞样品收集
  • 亲和纯化
  • 质量检测QA/QC
7天
阶段Ⅴ 亚克隆(可选)
  • 以阶段Ⅲ的质粒为模板进行亚克隆
  • 分别构建轻重链的表达质粒
4天

要求:客户提供状态良好的杂交瘤细胞

服务案例

重链轻链PCR结果
质粒鉴定结果
测序峰图

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