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鼠单抗制备 兔单抗制备 杂交瘤测序 蛋白表达

兔单抗SingleB®快速发现

兔B细胞独特的个体发育机制,造就了高亲和力、高特异性且稳定的兔单克隆抗体(mAb)。兔mAb皮摩尔级的亲和力水平为临床诊断及治疗提供了更高的灵敏度,降低抗体用量的同时,也降低了药物副作用。此外,对小分子物质和精细表位的出色识别能力,也让兔单抗在免疫诊断试剂和抗体药开发中越来越受欢迎,特别是在免疫组织化学、肿瘤检测及靶向治疗方面。

德泰生物兔单抗SingleB®快速发现技术,无需兔骨髓瘤细胞商业化授权,可直接对兔抗原特异性记忆B细胞和浆细胞进行筛选。仅需29天即可获得100株兔单抗,交付>50株经FACS Assay功能验证的抗体。

服务优势

高效率

全程29天
比杂交瘤省120天

无商业化限制

直接筛选B细胞
无杂交瘤商业化限制

“1+1”双保障

记忆B细胞 & 浆细胞
双筛选双保障

高概率

抗体多样性丰富
独特表位发现概率更高

服务流程

服务内容

阶段服务内容周期交付
阶段Ⅰ 动物免疫
  • 抗原制备(可选)
  • 动物免疫
  • 效价检测
2-4周 Premium Package

  • 大于50株FACS binder
  • 保障序列多样性
  • 抗体序列及表达质粒
  • 质量检验报告(CoA)

Economic Package

  • 5-10株ELISA阳性克隆
  • 抗体序列及表达质粒
  • 选1株纯化1mg抗体
  • 质量检验报告(CoA)
阶段Ⅱ “1+1”双筛选
  • 记忆B细胞筛选
  • 浆细胞筛选
1天
阶段Ⅲ BGE®高通量表达及功能验证
  • ELISA Assay
  • FACS Assay
1-2周
阶段Ⅳ 单克隆抗体基因测序
  • 高通量基因测序
1周
阶段Ⅴ 重组抗体表达与纯化(可选)
  • 转染级质粒制备
  • 瞬时转染表达
  • 高通量纯化
  • 无内毒素纯化
详询

SingleB®平台优势

德泰SingleB®同源杂交瘤异源杂交瘤噬菌体文库
局限性技术门槛高兔骨髓瘤细胞商业化限制异源融合稳定性差依赖于细菌中轻链正确转录、翻译、折叠和组装
抗体来源记忆B细胞 & 浆细胞浆细胞浆细胞记忆B细胞 & 浆细胞
重轻链配对天然配对天然配对配对受损非天然配对
通量x多样性极高
周期29天5-6个月3-4个月3-4个月
价格
交付全长抗体序列 & 重组质粒杂交瘤(易退化)抗体序列scFv、Fab、VHH序列 & 重组质粒

兔单抗优势

  • 结构稳定:90-95%的轻链为κ1,κ1的链内二硫键让轻链结构更稳定。
  • 亲和力高:抗体KD值达10-12M,亲和力是常规抗体的100-1000倍。
  • 识别精准:识别小分子(< 600 kDa)、PTM、单氨基酸取代等细微的表位变化。
  • 多样性丰富:非近交品系繁殖,亲和力成熟时间长,SGC、SHM多样性机制相结合。
  • 免疫应答强:对小分子抗原、半抗原可产生强烈免疫反应。
独特的抗体结构

兔IgG没有亚类,N末端和D-E环中具有较少的氨基酸,易于分子克隆和工程设计,更适于抗体药物开发。兔抗90-95%的轻链为κ1,其VL和CL之间存在链内二硫键,轻链结构更稳定。兔单抗能够识别小分子及翻译后修饰、单个氨基酸取代等细微的表位变化,表位识别特异性更高。

Fig1. 天然兔IgG示意图

注:白色代表κ轻链;浅灰色代表λ轻链;深灰色代表重链;橙色代表二硫键。

独特的B细胞发育机制

兔子通过与小鼠和人类不同的免疫机制产生抗体库,可对外来抗原产生强烈的免疫反应,且对免疫原性较弱的小分子、半抗原同样适用。人和小鼠通过VJ和VDJ基因重排来创建抗体库,再通过体细胞超突变(SHM)进一步多样化。兔子除了SHM机制外,还可以通过体细胞基因转换(SGC)引入额外的抗体多样性。

Fig2. 兔B细胞及抗体库发育

注:GALT为肠道相关淋巴组织

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