哺乳动物细胞蛋白表达服务

德泰生物提供哺乳动物细胞蛋白表达服务。我们拥有达到cGMP标准的百级洁净细胞房,及自主研发的哺乳动物系统高表达载体-proEMTM载体,结合定向驯化的CHO或HEK293细胞,采用无血清悬浮或粘附培养,细胞培养密度可达2-4×106cells/ml,蛋白表达产量可达毫克至克级别。德泰哺乳动物细胞表达服务可以提供:瞬时转染表达,重组抗体表达,稳定细胞系构建。我们具有以下优势:

服务优势:

  • 活性更高:哺乳动物系统,实现复杂糖基化修饰,蛋白活性更高;
  • 瞬时转染:细胞瞬时转染表达,蛋白/抗体的快速小量制备;
  • 稳定转染:cell pool/单克隆细胞株,几十种细胞转染经验;
  • 重组抗体:全长抗体表达,不成功不收费,IgG/IgM/IgE/IgD,scFv,Fab,VHH;
  • 自主研发:自主研发高表达载体,自建细胞房,实验成功率>95%;

细胞瞬时转染

哺乳动物细胞小量蛋白表达服务
德泰提供哺乳动物细胞瞬时转染服务,瞬时转染可在短期内获得一定量的可溶性蛋白,可用于基因产物的快速表达和蛋白的小规模制备。我们通过基因序列优化,自主研发的高表达载体,结合丰富的细胞转染经验,蛋白表达产量可达毫克至克级别,细胞培养密度可达2-4×106cells/ml…

稳定细胞株筛选

稳定细胞株构建
德泰提供哺乳动物细胞-稳定细胞系构建服务,稳定筛选的细胞株可以应用于多种研究领域,或用于目的蛋白/抗体的工业级生产,德泰拥有十几年细胞培养的经验,我们成功转染过几十种细胞系,通过抗生素筛选或利用基因缺陷原理进行筛选。CHO-K1,M14,HeLa,HepG2,THP-1,MCF-7,Vero…

重组抗体表达

重组抗体制备
德泰提供种类齐全的重组抗体表达服务,我们可以表达各类全长抗体或抗体片段,包括重组IgG/IgM/IgE/IgD,scFv单链抗体,di-scFv,Fab,F(ab’),sdAb/VHH,Fc融合蛋白,人鼠嵌合抗体等。您只需提供抗体基因序列(全长或可变区序列),我们可以交付毫克至克级别的重组抗体…

瞬时转染 VS 稳定细胞系构建:

比较项目 瞬时转染 稳定转染
(稳定细胞系构建)
原理 哺乳动物细胞瞬转 稳定细胞系构建
蛋白产量/L 毫克级/L 可稳定高产(克级)
细胞培养密度/L 2-4×106cells/ml 2-4×107cells/ml
实验周期 4-6周 3-6月
成本
培养细胞 CHO/HEK293 CHO
转染方法 脂质体/阳离子聚合物/电转/磷酸钙法转染

服务流程

Mammalian cell protein expression

  • 密码子优化:根据密码子简并性,优化mRNA结构,提高哺乳动物系统蛋白表达量
  • proEM载体:德泰通过表达元件的改造,获得双压力筛选的高表达proEM系列载体
  • 强调控元件:创新型Kozak序列,及优化的信号肽序列,使融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达效率更高
  • 蛋白纯化:德泰拥有完备的蛋白纯化平台,可以提供多种蛋白纯化方法。针对特定标签及无标签蛋白,我们保证交付至少>90%纯度以上的蛋白

蛋白表达系统选择

表达系统 哺乳动物表达系统 原核表达系统 酵母表达系统 昆虫表达系统
培养基成分 复杂 简单 简单 复杂
成本 中等 中等
蛋白折叠 正确折叠 可能需要重折叠 可能需要重折叠 正确折叠
翻译后修饰 修饰力强 有修饰能力 有修饰能力
N-糖基化 复杂修饰 简单修饰 简单修饰
O-糖基化
磷酸化
乙酰化
Γ-羧化