德泰生物新年大促,蛋白表达限时9折优惠

蛋白发酵大规模制备

德泰生物拥有成熟的蛋白表达系统和先进的蛋白表达技术。大量的蛋白是科研的前提条件,但蛋白大规模制备目前仍存在一定困难。我们提供的重组蛋白大规模制备服务包括:蛋白发酵,高密度发酵技术和工艺流程优化。德泰拥有多种类型发酵罐、生物反应器及蛋白纯化系统,可提供毫克至克级的重组蛋白。客户可根据自己的需要选择合适的表达系统和发酵方案。

服务内容

服务内容 发酵量 交付 周期 价格
蛋白发酵 5-50 mg/L 蛋白表达菌泥
实验报告
质检报告
1 周 询价
高密度发酵 20-400 mg/L 3周
工艺流程优化 100-1000 mg/L 高纯度重组蛋白
详细实验数据报告
质检报告
8-12周

发酵服务流程

蛋白发酵大规模制备流程

基因优化                      表达条件优化                蛋白发酵大规模制备              蛋白纯化

  • 基因优化:基因序列是决定蛋白表达成败的关键因素,德泰自主开发的MaxCodon™生物信息学软件基因优化项包括:mRNA结构、稀有密码子、核糖体结合位点等。
  • 表达条件优化:蛋白表达条件优化,包括温度、诱导物、OD等对蛋白表达量的影响因素优化,已获得后续发酵时更高的细胞培养密度和蛋白表达量。
  • 发酵大规模制备:分为普通蛋白发酵和高密度发酵,包括蛋白发酵过程优化,温度、pH、溶氧、补料方式等方面。补料分批策略是高密度发酵实现高收益的最有效方法(见下文高密度发酵技术策略)。
  • 蛋白纯化:在获得大量的蛋白表达菌泥,我们可以提供相应的蛋白纯化服务(可选),多种蛋白纯化方法选择,最终交付客户所需纯度的蛋白。

技术对比:

蛋白发酵技术对比

高密度发酵技术策略

补料分批策略是蛋白高密度发酵实现高收益重组蛋白的有效手段。通过调节培养条件,包括温度和酸碱值、培养物及底物的进料速率,能够最大限度地提高细胞质量和生产率。                大肠杆菌蛋白发酵大规模制备

补料分批策略:

  • 无反馈控制

定量补料—恒定的速率分批补料,结果是,有效的增长速率降低;

循序补料—循序渐进、逐步的进行补料,结果是进行一定的营养补偿,缓解因物质消耗而下降的生产速率;

指数流加补料—补料的方式采用指数的速度进行,从而实现恒定的比生长速率;

  • 间接反馈控制

溶氧—随着底物的消耗,溶氧量增加进行补料,增加氧气;

pH—随着反应的进行,底物被消耗,代谢物积累,pH增加,可进行补料;

二氧化碳释放率(CEO)—蛋白发酵实验中维持特定生长速率的最常用方法。通过质谱仪检测,碳源的利用率和二氧化碳的消耗率大致成正比;

细胞培养浓度—通过激光浊度计测得细胞浓度,补料的速度由细胞培养浓度决定。

  • 直接反馈控制

控制底物浓度—补料由发酵过程中碳源的浓度决定。(例如在发酵罐有实时的葡萄糖分析仪监测)

大肠杆菌菌株高密度发酵研究,通过在600nm处测得细胞的OD值

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